关于"毒死"光绪的嫌疑人，最先的就是慈禧老佛爷。首先光绪并不是慈禧的亲儿子，而因为支持"戊戌变法"的缘故，光绪皇帝和慈禧之间的矛盾已经十分之深。甚至因为光绪要"刺杀"慈禧的原因，两人的关系已经不可能恢复如初。
而光绪皇帝虽然一开始只是被囚禁，但是他终究比慈禧年轻。若是慈禧先去世，那么光绪皇帝自然就能重新掌权。这是慈禧说不愿意看到的。所以她的确有很大的可能会下手。但是没有相关的直接证据或者辅助证据可以证明。
也有说是袁世凯的，毕竟袁世凯背叛了光绪皇帝，投靠了慈禧。要是光绪皇帝宠重新掌权，袁世凯的下场也不会好到哪里去。所以他有极大的可能一不做二不休选择"投毒"，但是即便是软禁中的皇帝，袁世凯一个官员，要做到这一点也不简单。
