于定国少年时期就跟随其父亲学习法律。因才智出众办案有方升为侍御史，又升任御史中丞。正值汉昭帝刘弗陵去世，昌邑王刘贺被征召继位，行为淫乱，于定国上书规谏。
于定国
后来刘贺被废，汉宣帝刘询即位，大将军霍光兼任尚书事，他上书分条奏请皇上，凡是当时曾规谏过刘贺的大臣都破格升官。于定国因此而升任光禄大夫，平尚书事，很受重用。几年后，又改任水衡都尉，被破格提升为廷尉。
朝廷上下都称赞他说："张释之任廷尉，天下没有受冤枉的人；于定国任廷尉，百姓都自认为不冤枉。"做了十八年的廷尉，无一冤案，这在当时就是一个传奇了。
