一个正常人，摄入三氧化二砷，如果达到60至200毫克，即可致死；而光绪帝的部分衣服和头发上的三氧化二砷含量已经高达200毫克。也就是说，光绪帝的死因是砒霜中毒致死。
那么此砒霜之毒，乃是何人为之？
根据清代诸多史料，以及给光绪帝治疗的医生药方等资料，光绪帝生前确实有病，但并非急病，但其病并不立即致死。因此，光绪帝之死，必有人干预。
以当时的情况来看，除了慈禧太后，无人敢下次毒手。
有关慈禧太后和光绪帝的矛盾，在戊戌变法之后，两人矛盾升级，已经到了互不相容的地步。当时慈禧太后已经产生了废除光绪帝的计划，要么废掉，要么杀掉。比如在光绪二十四年八月初十，慈禧太后曾经以光绪帝的名义下了一道圣旨，说自己身体患病，诊治了很长时间，效果不明显，现在向全国发出旨意，请各地医生急速入京给朕诊治。
