在《三国演义》中，周瑜是一个妒忌心十分强的人，虽然他才智过人，但他见到了更胜他一筹的诸葛亮时，就暗自起了对诸葛亮的谋害之心。在赤壁之战前夕，周瑜用计谋使得蒋干盗取了假冒的书信，从而让曹操斩杀了善于带领水军的蔡瑁和张允。在此之后，周瑜故意让鲁肃去见诸葛亮，而诸葛亮在见到鲁肃时，就向鲁肃道贺，鲁肃不知原因，诸葛亮就向鲁肃解释，他称周瑜让鲁肃来试探自己是否知晓这个计谋，就是这件事可以道贺的地方，毕竟在蒋干离开后，蔡瑁和张允两人就要被曹操诛杀，江东就此没有了隐患。虽然诸葛亮多番叮嘱鲁肃，不要将这件事说给周瑜听，但鲁肃还是对周瑜如实说了。周瑜听闻诸葛亮如此厉害，当即称诸葛亮决不可留，他一定要将诸葛亮斩杀。
为了诛杀诸葛亮，周瑜不惜借大战将至，联军中缺乏箭矢为由，要诸葛亮在十日之内造出十万支箭出来。但诸葛亮却并没有惊慌，他称自己能在三日之内就造好十万支箭，更不惜与周瑜立下军令状，若是未完成任务，甘愿受到重罚。在此之后，诸葛亮向鲁肃借来二十只船，每船要军士三十人，船上都用青布为幔，并在每条船上放上一千个稻草人。三日后江面起了大雾，诸葛亮就驾着草船驶入曹营，就此骗来曹操的十万支箭，也暂时消除了来自周瑜的一次谋害。
后来诸葛亮和周瑜又共同制定了火攻曹营的计划，然而数日以来，江上一直刮西北风，即便用了火攻，也烧不着北岸的曹军，反而会烧到己方，周瑜因此郁结难治，诸葛亮知晓后，当即为周瑜开了一个药方，上面称"万事俱备，只欠东风"，周瑜见诸葛亮识破自己的心事，于是请教诸葛亮破解之法。而诸葛亮也不含糊，他早在此前推算出，不日既有东南风吹来，他故意设下七星法坛，在上面装模作样的做法。后来东南风起，周瑜觉得诸葛亮深不可测，立即派人到七星法坛去诛杀诸葛亮，只不过此时的诸葛亮早就逃到夏口了。有人认为，周瑜多次谋害诸葛亮，主要是因为他妒忌诸葛亮的才学，事实真是如此吗？
